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分享!马ELISA试剂盒的操作步骤和注意事项

发布时间: 2022-09-27  点击次数: 68次
  马ELISA试剂盒运用双抗夹心ELISA法定量测定血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体中(Ig)含量。下面我们来看看它具体的操作步骤和注意事项。
 
  马ELISA试剂盒的操作步骤:
  1.加样:标准品设定5个浓度点10个孔,每个浓度设定平行孔,加入50微升不同浓度的标准品,空白孔设定1个孔加入50微升蒸馏水、待测样品孔,在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
  2.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
  3.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
  4.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  5.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
  6.温育:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
  7.洗涤:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
  8.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
  9.终止:每孔加终止液50μl,终止反应。
  10.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
 
  马ELISA试剂盒注意事项:
  1.本试剂不同批号组分不得混用。
  2.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  3.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
  4.马ELISA试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
  5.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
  6.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
  7.严格按说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
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