分享！小鼠白介素ELISA试剂盒的实验操作步骤

　　小鼠白介素ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被小鼠白介素捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

 

　　它的五大优点：

　　1、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；

　　2、吸附性能好，空白值低。孔底透明度高的固相载体；

　　3、稳定的重复性和可靠；

　　4、高效、灵敏、特异的抗体；

　　5、较大限度的节省实验经费。

 

　　小鼠白介素ELISA试剂盒的实验操作步骤：

　　1、把试剂混匀，切记实验时不要加理大量含有泡沫的液体，避免实验产生误差。

　　2、跟数据测样决定板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

　　3、加入稀释好后的标准品50ul于反应孔 加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

　　4、甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

　　5、每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

　　6、甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

　　7、每孔加入底物各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。一定要避免光照。

　　8、取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

　　9、在450nm波长处测定各孔的OD值。